流式細胞儀用濾光片

流式細胞術(shù)是一種用于分析流體中大量熒光標記細胞的技術(shù)。當粒子通過(guò)聚焦光源時(shí)，可以測量散射光的量和熒光標記的發(fā)射。流式細胞術(shù)是基礎研究中非常重要的工具，用于研究細胞功能的許多方面，并已成為血細胞和癌癥診斷領(lǐng)域中非常重要的臨床技術(shù)。

為什么要考慮將 Semrock 濾光片用于流式細胞儀？

隨著(zhù)高性能流式細胞儀的發(fā)展趨勢是在可見(jiàn)光和近紅外波長(cháng)下使用多個(gè)激光器和大量檢測通道，擁有合適的濾光片對于更*地區分更多熒光團至關(guān)重要。Semrock 濾光片在市場(chǎng)上所有濾光片中具有最高的透射率，這意味著(zhù)您可以獲得更好的靈敏度。我們出色的激光純化濾光片/激光消雜濾光片選擇使您可以為氣體或 DPSS 激光器選擇超窄帶通濾光片，或者為具有相似波長(cháng)的多個(gè)激光器或二極管或光泵浦半導體激光器的系統選擇更寬的帶通濾光片，其輸出可從激光到激光，隨著(zhù)溫度或老化。Semrock 發(fā)射濾光片提供卓/越的激光線(xiàn)阻擋 (OD>6)

光密度OD

光學(xué)密度（Optical Density或稱(chēng)為 OD）是描述光通過(guò)高度阻擋的光學(xué)濾光片（當光的傳輸非常小時(shí)）的透過(guò)率的一種方便工 具。OD簡(jiǎn)單地定義為對數（底為10）的負變量。變量在0和1之間變化(OD = – log10(T))。因此，透過(guò)率就簡(jiǎn)單等于10的負OD值的 方 (T = 10– OD)， 左圖顯示了OD的影響：6個(gè)數量級（1000000次）的透過(guò)率變化，非常簡(jiǎn)單地用介于0到6的數字來(lái)表示；下面中間 的示例表和右下的“法則”列表提供了一些方便的技巧，可以在 OD 和透過(guò)率之間快速轉換。將變量 T 乘以2（或除以10）等于減 去0.3（或加上1），就轉換成了 OD 。

光密度本底噪聲：

通過(guò)精心優(yōu)化我們的測量設備和方法，Semrock能夠提供一些優(yōu)化的寬帶光密度（OD）。以下是此網(wǎng)站上顯示的大多數測量數據的典型OD噪聲本底限制。

對于介于320和1120 nm之間的波長(cháng)，接近或低于3e-7（光學(xué)密度6.5）的透射值受到測量噪聲的限制。

對于波長(cháng)<320 nm且在1120-1500 nm之間的波長(cháng)，接近或低于3e-6（光學(xué)密度5.5）的透射值受到測量噪聲的限制。

對于大于1500 nm的波長(cháng)，接近或低于1e-5（光學(xué)密度5.0）的透射值受到測量噪聲的限制。

同樣，對于某些濾光片和/或某些阻擋波長(cháng)范圍，顯示的本底噪聲僅為OD 4。

激光損傷閾值

激光對濾光片的損傷程度取決于多重因素，因此很難保證濾光片在所有可能情況下的性能。然而，確定激光損傷閾值（LDT）是有用的，使脈沖通量或強度低于該閾值就不太可能損害濾光片。

激光損傷閾值計算器

Semrock的激光損傷閾值計算器僅供參考/指導用途。

LDT計算器不適用的情況：LIDT試驗中激光損壞僅為某項關(guān)鍵參數時(shí)。即：此計算器僅適用于激光是唯/一的損傷源，環(huán)境中沒(méi)有其他的損傷源，如分子污染、物理污染、安裝應力、溫度等環(huán)境變量，大多數光學(xué)器件從未達到理想的計算LDT。LDT計算器根據標稱(chēng)規格按激光波長(cháng)和脈沖持續時(shí)間進(jìn)行縮放，但應注意的是，盡管方程式在納秒范圍內相當線(xiàn)性地縮放，但當切換為皮秒級時(shí)，損傷機理從主要是熱破壞變?yōu)殡娮訐舸?。脈沖持續時(shí)間。最后，大多數光學(xué)器件將具有特定的區域，這些區域由于材料吸收而具有較低的激光損傷閾值，其中包括OH線(xiàn)和較低的UV波長(cháng)范圍。

某個(gè)產(chǎn)品的激光損傷閾值是多少？

LDT規格可在“規格”選項卡的“光學(xué)損壞等級”標題下的每個(gè)產(chǎn)品網(wǎng)頁(yè)上找到?；蛘呤褂糜嬎闫?，在第一項下拉菜單“Product Family”中選擇對應的產(chǎn)品系列。該系列產(chǎn)品的激光損傷閾值即會(huì )出現在計算器頁(yè)面的右邊。

如何使用激光損傷閾值LDT計算器？

IBS離子束濺射硬鍍膜的Semrock濾光片提供了高的激光損傷閾值，但是這不意味著(zhù)其可以接受無(wú)上限的激光強度，更關(guān)鍵的是，你需要計算出安全使用的光斑大小，在此之內使用。使用此LDT激光損傷閾值計算器，屬于激光器的類(lèi)型和功率等參數，然后嘗試變化使用的光斑大小，直到綠色的安全信號出現。

各種不同類(lèi)型的激光器是如何造成濾光片損傷的？

脈沖激光器對比連續波激光器: 脈沖激光器在一系列持續時(shí)間 τ 為的脈沖中以重復率 R 和峰值能量 Ppeak發(fā)射光，連續波（cw）激光器以恒定功率P發(fā)射穩定的光束。大多數激光器的脈沖激光平均功率 Pavg 和連續激光恒定功率通常在幾毫瓦（mW）到瓦特（W）之間。本注釋末尾的表格總結了用于表征脈沖激光器輸出的關(guān)鍵參數。

下表概述了三種主要類(lèi)型的激光器預計會(huì )發(fā)生激光損傷的條件。

單位: P 用 Watts; R 用Hz; 直徑 用 cm; LDTLPin J/cm2.

注意: lspec 和tspec 分別是波長(cháng)和脈沖寬度, 在其中 LDTLP 已指/定。

* 連續波激光器和準連續波激光器的情況是粗略的估計，不作為保證規格。

長(cháng)脈沖激光器:

通常根據 “長(cháng)脈沖激光器” 的脈沖密度來(lái)指/定長(cháng)脈沖的損傷閾值。因為脈沖之間的時(shí)間是如此之大(毫秒)，受輻照的材料能夠熱放松-因此損壞通常不是熱誘導的, 而是由幾乎瞬間的電介質(zhì)擊穿引起的。通常損壞的結果是材料的表面或體積缺陷以及附近的不規則光場(chǎng)特性。Semrock濾光片 LDTLP 1 J/cm2 ，因此被認為是 “高功率激光質(zhì)量” 組件。一個(gè)重要的例外是窄帶激光線(xiàn)濾光片，其內部場(chǎng)強強烈地集中在幾層薄膜涂層中，從而產(chǎn)生了大約小一個(gè)數量級的 LDTLP 。

連續（cw）激光器:

cw 激光器的損壞往往是由熱 (加熱) 效應引起的?；谶@個(gè)原因，對于 cw 激光器，LDTCW更加依賴(lài)于樣品的材料和幾何性質(zhì)，因此，與長(cháng)脈沖激光器不同，用單個(gè)數量來(lái)指/定是更加困難的?；谶@個(gè)原因，Semrock 不測試也不指/定其濾光片產(chǎn)品的 LDTCW 。作為一個(gè)很大概的規則，許多全玻璃組件，如介質(zhì)膜的反射鏡和濾光片都有一個(gè) LDTCW (強度指/定為 kW/ cm2 ) ，這個(gè)值至少是長(cháng)脈沖激光激光損傷閾值LDTLP 的10倍(指/定為強度來(lái)定量，單位是 J/cm2)。

準連續激光:

準連續激光是在飛秒 (fs) 到皮秒 (ps) 范圍內，脈寬 τ 的脈沖激光。而且，高功率激光器的重復頻率通常在 10-100 MHz 左右。這些激光器通常是鎖模的，這意味著(zhù)頻率由激光腔內的光的往返時(shí)間決定的。這樣高的重復頻率，脈沖之間的時(shí)間非常短，不可能發(fā)生熱松弛。因此，在 LDT 方面，準連續激光通常大概按照類(lèi)似連續激光器處理，使用平均強度代替連續激光強度。

舉例: 雙頻 Nd:YAG 激光器，波長(cháng)為 532 nm，假設該激光器的參數為： τ = 10 ns, R = 10 Hz, 和 Pavg = 1 W. 那么 D = 1 x10–7,E = 100 mJ, 并且 Ppeak= 10 MW. 對于光斑直徑 = 100 μm, F = 1.3 kJ/cm2, 所以某產(chǎn)品 LDTLP = 1 J/cm2 就和可能被損壞. 但是，如果使用時(shí)的光斑直徑 = 5 mm, F = 0.5 J/cm2, 此時(shí)，這個(gè)濾光片產(chǎn)品就很可能不會(huì )被損壞。